Labodia : atlas des cellules HEp-2 : images nucléaires

Contenu

Images homogènes
Homogène
Homogène - périphérique

Membranaires
Homogène membranaire (lamine)
Pores nucléaires
Périchromine

Images mouchetées
RNP
SL / Mi
SS-B
SS-A
PCNA
Centromère
NSP1

Homogènes

Homogène : fluorescence marquant uniformément le noyau et recouvrant ou non les nucléoles; la région chromosomique des cellules en mitose est nettement marquée.

ATTENTION: une image homogène résulte souvent de la superposition de plusieurs images ou masque une autre image; diluer systématiquement les échantillons homogènes.

Les cellules en mitose permettent de différencier entre une image homogène et une image finement mouchetée : lorsque l'image est exclusivement mouchetée, les cellules en mitose présentent une fluorescence mouchetée couvrant soit la totalité de la cellule, soit la cellule moins la région chromosomique.

Lorsque la région chromosomique est marquée, on est en présence de deux ou de plusieurs anticorps qui devront être titrés séparément.

homogène

Anticorps

		anti-nADN anti-dsADN, anti-ssADN, anti-DNP*
		anti-histones (HI, H2 A, H2 B, H3, H4)
		reconnaissant d'autre antigènes de la chromatine (prolamines, protamines, etc).

*DNP = complexes ADN-histones

Associations cliniques

		LED (anti-ADN, anti-histones lorsque les titres sont élevés)
		lupus médicamenteux (anti-histones)
		polyarthrite rhumatoïde (anti-histones)

Examens complémentaires

		anti-nADN par ELISA
		anti-histones par ELISA
		Remarque : les examens complémentaires sont indispensables car de nombreux antigènes autres que l'ADN et les histones peuvent produire une image homogène; toutefois, grâce aux cellules en mitose, les cellules HEp-2 constituent un bon test d'orientation: les anticorps anti-ADN et anti-histones induisent une fluorescence de la région chromosomique à tous les stades de la mitose alors que pour d'autres anticorps, la fluorescence n'est visible que dans la méta- et la prométaphase.

Homogène - périphérique

		Homogène - périphérique : la fluorescence est particulièrement intense à la périphérie du noyau avec un large anneau lumineux correspondant à la membrane nucléaire interne; le reste du noyau présente une fluorescence uniforme, mais de moindre intensité. Les cellules en mitose sont fortement marquées avec un aspect similaire.
		ATTENTION : utiliser les cellules en mitose pour différencier une image périphérique d'une image membranaire: dans le cas d'une image membranaire, on n'observe pas (ou peu) de fluorescence dans les cellules en mitose, seule exception, une fluorescence de la périchromine (rare) entraîne une intense réaction des cellules en mitose localisée exclusivement autour de la région chromosomique.

homogène périphérique

Anticorps

		anti-nADN anti-dsADN
		anti-histones (H1, H2 A, H2 B, H3, H4) Remarque: les anti-histones sont très rarement associés à une image périphérique.
		reconnaissant d'autres antigènes de la chromatine.

Associations cliniques

		LED (anti-ADN, anti-histones)
		lupus médicamenteux (anti-histones)

Examens complémentaires

voir images homogènes

Membranaires

Homogène membranaire (lamine)

		lamine : fluorescence homogène de la membrane nucléaire (fluorescence annulaire); la région chromosomique des cellules en mitose n'est pas marquée, sauf à la fin de la télophase où les deux noyaux sont entourés d'une fine ligne fluorescente.
		NE PAS CONFONDRE avec une image périphérique (utiliser les cellules en mitose).
		parfois associée à une image homogène.

Image homogène associée à une fluorescence homogène membranaire

Anticorps

anti-lamines A, B and C (protéines fibrillaires de la membrane nucléaire).

Associations cliniques

		LED, sclérodermie linéaire, polyarthrite rhumatoïde.
		association hépatite chronique - thrombopénie et/ou anémie hémolytique cortico-sensible.

Pores nucléaires

Pores nucléaires : fluorescence annulaire ponctuée; fins granules fluorescents dans le nucléoplasme; la région chromosomique des cellules en mitose n'est pas marquée mais elle est entourée d'une zone d'intense fluorescence homogène.

Anticorps

dirigés contre des protéines du complexe des pores nucléaires.

Associations cliniques

polymyosites.

Périchromine

Périchromine : intense fluorescence annulaire; cellules en mitose : forte fluorescence entourant la région chromosomique.

Anticorps

dirigés contre la périchromine (protéine membranaire).

Associations cliniques

LED

Mouchetées

RNP

		hnRNP* : gros grains fluorescents couvrant la totalité du nucléoplasme et reliés entre eux par un réseau de filaments fluorescents; la région chromosomique des cellules en mitose n'est pas marquée.
		* hnRNP = ribonucléoprotéines nucléaires hétérogènes.
		Observation rare en tant qu'image isolée, le plus souvent associée à une image de type Sm / RNP.
		Sm / nRNP : granules irréguliers couvrant la totalité du nucléoplasme; la région chromosomique des cellules en mitose n'est pas marquée.
		parfois associée à une image nucléolaire.

hnRNP

SM nRNP

Anticorps

		dirigés contre différents constituants de la matrice nucléaire
		anti-nRNP (ribonucléoprotéine nucléaire = U1 RNP)
		anti-Sm (complexe U1, U2, U4, U5 RNP)

Associations cliniques

		LED (Sm)
		connectivites mixtes (Sm)
		syndrome de Gougerot-Sjögren, sclérodermie polyarthrite rhumatoïde, LED, lupus discoïde induit par la procaïnamide (RNP).

Examens complémentaires

rechercher les anti-Sm / RNP par ELISA.

SL / Mi

		SL / Mi : fines granulations de faible intensité couvrant le noyau; à ne pas confondre avec une image de type SS-A; la région chromosomique des cellules en mitose n'est pas marquée.
		souvent associée à une image de type PCNA, parfois à des images nucléolaires.

Anticorps

		anti-Mi (Mi1 and Mi2).
		anti-SL (synonyme de "anti-Ki" ou de "anti-Ku").

Associations cliniques

		LED.
		dermatomyosite.

SS-B

		SS-B : mouchetée : fluorescence intense et granulaire donnant au nucléoplasme l'aspect d'une vitre couverte de givre; la fluorescence couvre l'ensemble du nucléoplasme et s'étend parfois aux nucléoles avec quelques grains isolés dans le cytoplasme (assez courant); la région chromosomique des cellules en mitose est faiblement marquée ou pas du tout.
		souvent associée à une image de type SS-A.

SS-B

Anticorps

anti-SS-B (La, Ha)

Associations cliniques

		syndrome de Gougerot-Sjögren
		LED
		hépatite chronique active

Examens complémentaires

confirmer par ELISA.

SS-A

		SS-A : fines granulations recouvrent la totalité du noyau; la région chromosomique des cellules en mitose n'est pas marquée.
		souvent associée à des images de type SS-B.

SS-A

SS-A / SS-B

SS-A SS-B

Anticorps

anti-SS-A (Ro)

Associations cliniques

		syndrome de Gougerot-Sjögren
		LED, lupus néonatal, bloc cardiaque congénital
		autres maladies systémiques.

Examens complémentaires

confirmer par ELISA.

PCNA

		PCNA : fluorescence mouchetée très irrégulière, allant de l'absence totale de réaction dans certaines cellules à la présence de fines ou de larges granulations dans d'autres (pléomorphisme); contrôler l'absence de fluorescence dans la région chromosomique des cellules en mitoses.:
		Cette image est rare mais facile à confondre avec un autre marquage pléomorphe où le cytoplasme de certaines cellules contient également des granules fluorescents. Cette dernière image constitue un faux positif et résulte d'une réaction polyclonale dirigée contre les sites de synthèse protéique après une infection.
		voir également les images de type MSA-2 et MSA-3 pour éviter toute confusion avec une image caractéristique des cellules en mitose.
		Les images de type PCNA sont parfois associées à des images homogènes.

PCNA

Anticorps

anti-PCNA ("proliferating cell nuclear antigen" = cycline).

Associations cliniques

		LED
		Lymphomes.

Examens complémentaires

		confirmer par immunodiffusion ou par contre-immunoélectrophorèse.
		recherche des anti-DNA par ELISA en cas d'association à une image homogène.

Centromère

		Centromère : 23 ou 46 (ou multiples de 46) grains brillants, ovoïdes, répartis dans le noyau des cellules en interphase; dans les cellules en mitose, ces granules sont regroupés dans la région chromosomique.
		parfois associée à des images nucléolaires homogènes.

Centromère

Anticorps

anti-centromère (kinétochore); en fait, ces anticorps sont dirigés contre plusieurs protéines distinctes du centromère.

Associations cliniques

		CREST (Calcinose, Raynaud, Oesophage, Sclérodactylie, Télangiectasie)
		sclérodermie
		cirrhose biliaire primitive.

NSP1

		NSP1 ou nucléaire ponctuée ("NSP1 = nuclear speckeld type 1") : grains de taille relativement uniforme limités au nucléoplasme; la région chromosomique des cellules en mitose n'est jamais marquée. ATTENTION : ne pas confondre avec une image de type centromère : vérifier le nombre de grains fluorescents :
		2 - 4 grains : "nuclear dots"
		5 - 10 grains : "multiple dots".
		souvent associée à des images de type actine ou mitochondrial.

NSP1
Exemple: NSP1-nuclear dots associés à une image mitochondriale

Anticorps

dirigés contre des protéines nucléaires partiellement caractérisées (32, 80 et 100 kDa)

Associations cliniques

		cirrhose biliaire primitive (signe d'alerte)
		hépatite chronique active
		Note : une association NSP1 + actine suggère une hépatite chronique active tandis que l'association NSP1 + mitonchondries est davantage caractéristique d'une cirrhose biliaire primitive.

Examens complémentaires

		tester régulièrement la fonction hépatique chez les sujets avec test HBsAg positif.
		voir également images de type actine ou mitochondrial.